描述：活性氧包括超氧自由基（O²•−）、过氧化氢（H₂O₂）、羟基自由基（•OH）、过氧亚硝基（ONOO−）、一氧化氮（•NO）等，参与了细胞增殖、发育分化、衰老和凋亡等多种生理和病理过程，涉及到氧化应激、细胞凋亡和衰老、铁死亡等多种代谢通路。试剂盒利用荧光探针DHE进行活性氧检测。DHE可自由透过活细胞膜进入细胞内，在细胞质中呈蓝色荧光（Ex/Em=370/420nm），当被细胞内的ROS氧化后，脱氢形成溴化乙锭。溴化乙锭可以与RNA或DNA结合产生红色荧光，使细胞核呈现明亮的红色（Ex/Em=518/610nm），荧光水平与细胞内活性氧水平成正比。

适用：检测贴壁细胞、悬浮细胞、新鲜动物组织中的活性氧水平

工作波长：最佳激发波长518nm（也可以535nm），最佳发射波长610nm，也可按照PE或FL2通道检测。

所需设备：流式细胞仪、荧光酶标仪、激光共聚焦显微镜等。

组成：

说明：

1. 本试剂盒特别适用于贴壁细胞和悬浮细胞活性氧的检测。动物组织样本应尽量选择新鲜组织，如样本已经冻存，无法保证检测结果的可靠性。

2. 稀释DHE可1* PBS或无酚红培养基。血清或培养基的颜色并不会影响DHE及细胞内荧光的产生，但可能会影响荧光显微镜观察，干扰荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪的荧光测定。

3. 加入DHE的时机和孵育时间，以最终能顺利检测细胞内活性氧为目的，当细胞药物处理时间较短(如<2小时)或预计ROS效应较弱时，可将DHE在药物处理之前或者与药物同时加入到细胞培养基中；反之当药物处理时间较长(如>6小时)或预计产生ROS效应较强时，可将DHE在药物处理之后再加入。

4. 活性氧供体的细胞工作浓度为20-100uM或更低，当其浓度超过200uM时将产生细胞毒性。如果用户熟悉ROS荧光或实验没有必要采用阳性对照，可以不加该试剂。