产品描述:
游离脂肪酸(free fatty acids, FFA)通常指10碳以上的非酯化脂肪酸(nonesterified fatty acid, NFFA),在血中与白蛋白结合形成简单的脂蛋白,参与机体能量代谢,也参与肥胖、高脂血症、糖尿病等病理进程,是临床和基础研究常用的检测指标。非酯化脂肪酸也是农业轻工业等领域的经常性检测项目。脂肪酸测定有滴定法、比色法、原子分光光度法、高压液相层析法和酶法等。本试剂盒采用比色法,经过优化能够检测实体组织、细胞、血清中的游离脂肪酸含量,线性范围10-1000umol/L 。
产品原理:游离或非酯化脂肪酸NFFA和Cu2+特异反应,形成立体笼状结构的脂肪酸-铜皂分子复合物,与显色剂反应后生成紫红色络合物,其光密度值与游离脂肪酸浓度成正比。
适用范围:测定各类动物组织、细胞、血清中的游离脂肪酸油浓度。
产品特点:
1. 试剂盒经过优化,线性范围宽,灵敏度高;
2. 适用样本范围广,可测定各类动物组织、细胞、血清中的游离脂肪酸油含量;
3. 优化的提取方法,效率高,稳定性强;
4. 操作简单省时,1h内即可完成测定;
5. 无需特殊仪器,常规操作即可。
组成:
组份 | 50次 | 105次 | 200次 | 储存和效期 |
R1 | 2.5ml | 5ml | 10ml | 2-8ºC,半年有效 |
R2 | 2.5ml | 5ml | 10ml | 2-8ºC避光保存,半年有效 |
沉淀剂 | 1.5g | 3g | 6g | 2-8ºC保存,半年有效 |
显色剂 | 3.5ml | 7ml | 14ml | 2-8ºC避光密封保存,半年有效 |
脂肪酸标准品(10mM) | 0.5ml | 0.5ml | 1ml | 2-8ºC,半年有效 |
自备试剂:正庚烷、无水甲醇、氯仿
萃取液(自备):取一个玻璃瓶,按照正庚烷:无水甲醇:氯仿=24:1:25的比例配制,盖紧后混匀,2-8ºC保存。推荐使用新鲜配制的萃取液进行实验操作。
所需设备:
酶标仪、721、722型可见光分光光度计。最佳工作波长550nm,如无此波长建议优先选用570nm、次选530、490nm。
相关问题及解决方案:
Q1:冻存样本可以测定FFA含量么?
A1:尽量使用新鲜样本,-20ºC储存不超过10天。一般情况下血甘油三酯能水解脂肪酸,即使4ºC保存FFA也可升高20%左右。
Q2:反应体系可以调整么?
A2:可以按照各组分加样比例,微调体积,由于试剂的特殊性,调整比例不宜超过20%。
Q3:样本提取有哪些注意事项?
A3:
1) 提取液为有机试剂,现用现配,防止挥发;
2) 样本裂解过程中,室温涡旋振荡速度不能低于1000rpm,时间不能低于15min,如果想缩短提取时间,可提高震荡转速2000-3000rpm,震荡时间10min;
3) 各样本裂解震荡时间和条件需一致,减少误差。
Q4:测定时加入显色剂注意事项?
A4:显色剂易挥发,与样本反应时切记盖紧管盖,反应完毕后,立即上机测定,减小误差。
Q5:样本较少,可以同时测定FFA、TC、TG么?
A5:测定FFA需要单独裂解,测定TC、TG可以用普利莱E1013、E1015试剂盒。
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