乳酸LA含量测定试剂盒 E2063

描述：乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物，与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关。LDH催化乳酸脱氢生成丙酮酸，使NAD⁺还原成NADH与H⁺。PMS递氢使WST-8还原为有色产物。在450nm处测吸光度，与乳酸含量呈线性关系。

试剂盒组份：

请严格按保存条件保存试剂盒组份

工作液配制：

试剂1、试剂2按45:1比例混合配制成：酶工作液 根据实际用量现用现配，当天使用

试剂3、试剂4按1:1比例混合配制成： 显色剂 根据实际用量现用现配，当天使用

标准品配制，将提供的10uM/mL的乳酸标准品用蒸馏水稀释至1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125uM/mL。

实验步骤

1. 样品的准备：

1.1 组织样品制备：利用含1mM EDTA的PBS灌流或漂洗组织，去除组织中的血液，然后取约30-50mg组织，加入500μl的预冷的PBS，冰浴匀浆。4℃、10000g离心10分钟。取上清和蛋白沉淀剂溶液1:1混合，4℃、10000g离心10分钟。取上清，使用检测缓冲液稀释5倍后可进行检测。

1.2血清、培养液样本制备：收集血清、培养液，和蛋白沉淀剂溶液1:1混合，4℃、10000g离心10分钟。取上清，使用检测缓冲液稀释5倍后可进行检测。

2. 按下表进行操作

一般情况下，样本对照管每批只需做1-2支，若样本不存在溶血、脂血现象，对照管可以不做。

于450nm测定各管吸光度值。

3.数据处理

利用乳酸标准品浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标制作标准曲线，并获得横纵坐标之间的函数关系式，然后利用函数关系式和各样品的吸光度值计算样品的乳酸浓度。

注意事项：

1. 血清，组织块置于-20℃冰箱冷冻，可保存一个月左右，-70℃ 可保存2-3个月，解冻后样本或组织匀浆必须当天测定。

2. 若样本测得吸光度值大于标准品最高点吸光度值，需将样本稀释后再进行测定。

3. 初次使用试剂盒时，小体积液体试剂请适当离心后使用。

4. 本产品仅限专业人员用于科学研究，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。