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UltraGel 广谱超清配胶试剂盒 AP0001
描述:从蛋白电泳的理论和实践上,只采用单一浓度的 SDS-PAGE 凝胶来同时分离 10-300kDa 宽范围的大小蛋白条带是很困难的;采用 4-20%连续浓度梯度的 Tricine- SDS-PAGE 系统,可分离 5 -200 kDa 蛋白条带,但配胶难度高,电泳时间长,条带易变形。 普利莱深挖 SDS-PAGE 蛋白凝胶电泳基本理论结合既往产品实践经验,经研发优选,全新推出可以 同时分离 10-300kDa 宽范围大小条带、分辨率高、电泳速率快的通用系统,即 UltraGel 广谱超清配胶试剂盒,与常规配胶试剂盒相比具有以下特征:
1. 广谱,单一浓度一块凝胶可同时分离 10-300kDa 条带(如有需求可以单独提供最小分离 3kDa 的凝胶系统)。
2. 超清,10-300kDa 范围的分辨率更高,有效清晰分离出来的蛋白条带数目,显著超出普通凝胶, 且条带更加锐利整齐。对常见的 40-80kDa 范围条带的分辨率极佳,这一优异禀赋可以拓宽的应用 场景有:(1) 能有效分辨展示因蛋白磷酸化、糖基化修饰导致 1-3kDa 微小表观分子量差异条带, 让磷酸化检测更漂亮;(2)有利于精准分辨分离和挖出条带,使蛋白质组学分析的辨识度更精准 可靠。
3. 便捷,即用即配,操作简单,无需计算。
4. 快速,搭配普利莱快速电泳液,半个小时即可完成电泳。
5. 兼容性好,兼容后续常规转膜条件。
6. 配有红色染料浓缩液,依个人习惯加入后上样孔清晰可见,方便上样,电泳开始后染料不随 电泳迁移,在凝胶中不与蛋白相互作用,不影响蛋白电泳,不影响后续转膜、染色过程。注意其 他商业化凝胶的浓缩胶染料可能对蛋白具有潜在化学修饰影响。
储存和效期:常温运输;收到后各组分按要求保存,6 个月有效。
操作步骤:
以一块 0.75/1.0/1.5mm 胶为例
1. 取等体积的下层胶组分 A(2X)和下层胶组分 B(2X),各 2.0/2.7/4.0ml,混匀。
2. 将步骤 1 的混合液中加入 40/60/80ul 的改良型促凝剂,轻柔混匀。
3. 将步骤 2 的混合液注入凝胶玻璃板中,使液面距离短玻璃板上沿的距离为 1.5-2.0cm 即可(注 意:此溶液为过量,请勿全部注入,可留少许与配胶杯中,以便判断凝胶状况),加入适量水 或醇(如异丙醇,正丁醇等),覆盖于下层胶液面之上。
4. 静置 约 15min,下层胶凝固。(当水/醇和胶之间有一条折射线时,说明胶已凝固。凝胶时间 与环境温度有明显的正相关性,同等条件下,温度越高,凝胶速度越快;室温过高时建议适 当减少改良型促凝剂用量;相反,如果室温过低,可以延长凝胶时间。)
5. 待下层胶凝固后,倒去水/醇。取等体积上层胶组分 A(2X)和上层胶组分 B(2X),各 0.5/0.75/1.0ml,混匀。
6. 向步骤 5 的混合液中加入红色染料浓缩液(250X)4/6/8ul,混匀。(注意:由于染料特殊理 化性质,使用前请摇匀。)
7. 向步骤 6 的混合液中加入 10/15/20ul 的改良型促凝剂,轻柔混匀。
8. 将步骤 7 混合液注入制胶板中,插入梳齿。
9. 待上层胶凝固后(约 15min),拔去梳齿即可用于电泳。
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