基因组DNA污染清除试剂(清除RNA样品中的DNA污染) DNAeraser R1140
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描述:制备RNA时基因组DNA污染将会干扰下游PCR或Northern Blot实验。用RNase-free的DNase消化DNA也会导致RNA降解。基因组DNA污染清除试剂不含DNA酶,在强烈抑制RNA酶的同时彻底清除RNA样品中的DNA和蛋白质污染,进一步纯化RNA。最后通过乙醇沉淀回收得到的RNA纯度极高,完全不影响原有RNA质量和下游应用。
用途:非酶法清除RNA样品中的基因组DNA污染。每ml试剂处理~100µg RNA样品。
组成:50ml 基因组DNA污染清除剂,100次。
储存:4℃避光储存 12个月有效
效果展示:
图:DNA污染清除试剂效果
新鲜大鼠肌肉组织总RNA的普通琼脂糖凝胶电泳。
Before:清除前
在提取RNA时故意吸取较多的含基因组DNA成分,并向最终的RNA样品中加入少量大鼠基因组DNA。
After:清除后
使用DNA污染清除试剂之后,彻底清除RNA样品中的污染DNA。
使用方法:
根据起始RNA溶液的体积,按比例加入所需试剂。以下操作以100µl RNA溶液为例。除非RNA溶液中RNA浓度很低,为方便操作可用高压灭菌过的蒸馏水将不足100µl的RNA样品的体积补充到100 µl。
1. 每100µl RNA溶液加入500µl基因组DNA污染清除试剂。充分混匀,冰育1分钟。
2. 加入自备的氯仿100µl。充分混匀,冰上孵育1分钟。
3. 12000rpm低温离心10分钟。
4. 取上清约300 µl转移到新管。应留下少量上清勿触动含DNA的中间相,否则重新离心。
5. 加2-2.5倍上清体积的无水乙醇,充分混匀,冰上或-20C孵育20分钟。如果取出的上清液量较多,此步骤可加入0.6-1倍上清液体积的异丙醇沉淀。
6. 12000rpm低温离心10分钟。弃上清。
7. 加500µl 70%乙醇,振荡洗涤沉淀。12000rpm低温离心10分钟。弃尽上清。
8. 敞开管口,空气干燥RNA沉淀。
9. 加入适量自备的蒸馏水或缓冲液溶解RNA沉淀。1% 普通琼脂糖凝胶电泳检查RNA。
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