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TTC 染色液
描述:
2,3,5-氯化三苯基四氮唑,又称四唑红,英文名称: 2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,简称TTC,TTZ,或TPTZ。CAS号为298-96-4,分子式:C19H15ClN4,分子量:334.8。 TTC是一种脂溶性光敏感复合物,它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,能与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色。原理是TTC本身可作为一种氧化还原指示剂,活细胞内的脱氢酶(尤其是线粒体内的琥珀酸脱氢酶)可以将TTC还原为不溶性的红色稳定的三苯基甲臢(1,3,5-triphenylformazan,TTF),活组织被染成不同程度的红色。当组织缺血、细胞死亡或无生命力时,缺血梗塞组织内的细胞呼吸酶活性下降,则不能发生还原反应,不会产生成色变化、而呈苍白色或染色浅。因此,根据染色部位和染色深浅程度可以鉴定组织或者种子的活力。常用于检测种子的生存能力以及检测实验动物组织的缺血梗塞状况。TTC常用的染色浓度为2%(w/v),也可根据组织类型做浓度的适当调整。
原理:
正常组织中的脱氢酶可以将TTC还原成不溶性的红色稳定的三苯基甲臢(TTF),而呈红色。如果脑组织细胞或胚种细胞死亡或生活力衰退,则不能染色或染色较浅。根据染色部位和染色深浅程度来鉴定组织缺血死亡或者种子的活力。
适用范围:
适用于尸检中的新鲜心、脑组织以及实验动物早期梗死组织的染色,测定脑梗死灶体积。
规格:
规格:100mL
储存:
保存:2~8℃避光保存(棕瓶),有效期1年。
染色步骤:
1.按照实验设计自行制作组织模型,切片。
2.染色:取新鲜组织或切片完全浸泡于TTC染液中,放入30-37℃的恒温箱内保温15~30分钟,边孵育边观察颜色变化 。
3.染色后用清水或PBS缓冲液轻轻清洗,观察染色结果并拍照记录。
4.若需长久保存,用4%多聚甲醛溶液或福尔马林固定10~20分钟。
染色结果:
正常组织被染成红色,梗死区不被染色。
说明:注意事项:
1.TTC染色液可重复使用2-3次,可将用过的TTC染色液放到新的容器内继续使用。TTC溶液若变成红色则不可再用。
2.显色时要使组织切片全部浸入TTC染色液中。
3.本品具有微量的光和热敏感性,使用以及存放的过程中避免长时间曝光或者接触到过高温
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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