产品简介：

脱氧核糖核酸(DNA)染色方法有Feulgen法、甲基绿-派洛宁法、吖啶橙荧光法等，其中最经典的是Feulgen法, 该法是一种经典的酶组织化学法。

Leagene Feulgen Stain原理在于DNA经温和的弱酸(例如盐酸)水解后，嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开，并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开，在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与Schiff试剂结合，形成紫红色化合物，使细胞内含有DNA的部位呈紫红色，紫红色的产生是因为反应产物的分子内有醌基(醌基是一个具有颜色的发色团，所以凡含有DNA的部位就呈紫红色，该水解作用不影响核糖-嘌呤结合键，因此RNA用此法处理后则分解，所以该法不适用于证明RNA。 该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

组成：

试剂（A）:Schiff Reagent 50ml 4℃ 避光

试剂（B）:B1：弱酸溶液50ml RT

B2：亚硫酸盐溶液50ml RT

自备材料：

1、蒸馏水、系列乙醇、Carnoy 固定液或 10％福尔马林固定液

2、二甲苯或环保浸蜡脱蜡透明液、亮绿或苯胺蓝染色液

3、恒温箱

操作步骤（仅供参考）:

（一）石蜡切片染色

1、组织固定：Carnoy固定较好，10％福尔马林亦可，不宜采用Bouin 固定液。

2、 石蜡切片经二甲苯或 Leagene 脱蜡透明液脱蜡至蒸馏水。

3、配制弱酸工作液：按弱酸溶液：蒸馏水＝1:4配制，即取1份弱酸溶液、4份蒸馏水，充分混合，即获得弱酸工作液。

4、配制SO2水工作液：按弱酸溶液：亚硫酸盐溶液：蒸馏水＝1:5:94配制，即取弱酸溶液1份、亚硫酸盐溶液5份、蒸馏水94份，充分混合，即配即用。

5、 切片入弱酸工作液，室温浸洗10~20s。

6、 切片入预热至60℃的弱酸工作液，孵育 8min。

7、切片入弱酸工作液中，室温浸洗10~20s，蒸馏水冲洗。

8、 切片入 Schiff Reagent，室温避光染色45~90min。

9、 用新鲜配制的SO2水工作液洗切片3次，每次90s。

10、蒸馏水中洗净，经系列乙醇脱水，二甲苯或 Leagene 脱蜡透明液透明并封片。

（二）冰冻切片染色

1、冰冻切片预处理：用乙酸：无水乙醇（1:3）混合固定10min。

2、 由无水乙醇水至蒸馏水。

3、 余下步骤同上述石蜡切片染色。

染色结果：

细胞核内 DNA红紫色

阴性对照：将同样切片经上述步骤处理，只有步骤6改为"切片入蒸馏水室温孵育 8min。"结果为细胞核 DNA阴性。

注意事项：

1. 水解时间很重要，并且应使用恰当的固定时间。不同的固定液水解时间不一样。

水解时间（min)

Carnoy 固定液  8min

Helly 固定液  8min

Susa 固定液  18min

福尔马林  8min

Zenker液  5min

2. 注意Schiff Reagent的纯净程度，若变浅粉红亦可考虑使用，颜色变红则弃用。

3. 去除切片上多余 Schiff Reagent的方法以SO2水洗为好。

4. 应做阴性对照试验。

5. 上述试剂均对人体有刺激性，请注意适当防护。

6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：6个月有效。低温运输，按要求保存。